EZTrans細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑作為新一代的轉(zhuǎn)染試劑,其轉(zhuǎn)染原理是帶正電的陽(yáng)離子聚合物與核酸中帶負(fù)電的磷酸基團(tuán)形成帶正電的復(fù)合物后與細(xì)胞表面帶負(fù)電的蛋白多糖相互作用,并通過(guò)胞吞作用進(jìn)入細(xì)胞。本產(chǎn)品經(jīng)過(guò)李記生物的優(yōu)化處理,具有轉(zhuǎn)染效率高,細(xì)胞毒性低,操作簡(jiǎn)單,重復(fù)性好,適用范圍廣等特點(diǎn)。...
生物大分子的貯藏保存可分為干態(tài)和液態(tài)貯藏兩種。蛋白質(zhì)失活受多種理化因素的影響,主要有空氣、溫度、水分、光線、酸堿度、樣品狀態(tài)、微生物活動(dòng)、保存時(shí)間和容器等。這些因素可單獨(dú)起作用,但更多情況是協(xié)同作用。總的來(lái)說(shuō),蛋白質(zhì)的保存主要考慮其構(gòu)型穩(wěn)定、活性中心的保護(hù)、避免輔助因子喪失等,以防止其變性、解聚或降解。由于溫度和水分對(duì)蛋白質(zhì)的穩(wěn)定性影響很大,故蛋白質(zhì)最好是低溫、冷凍或冷凍干燥后低溫干燥保存。1.液態(tài)保存(1).在低溫下保存蛋白質(zhì)對(duì)熱敏感,溫度越高,穩(wěn)定性越差。因此,低溫保存蛋...
牛血清白蛋白(BovineSerumAlbumin,BSA)是牛血清中的一種球蛋白,又稱第五組分(需要注意的是,第五組分并不是BSA的一種組份,而是EdwinJ.Cohn教授早期從血液中通過(guò)特定的分離技術(shù)得到5種組份,其中第五種就是白蛋白),CAS號(hào)為9048-46-8,包含583個(gè)氨基酸殘基,分子量為66.430kDa,等電點(diǎn)為4.7。牛血清白蛋白在生化實(shí)驗(yàn)中有廣泛的應(yīng)用,無(wú)免疫球蛋白IgG牛血清白蛋白產(chǎn)品血液中的白蛋白主要起維持滲透壓作用、PH緩沖作用、載體作用和營(yíng)養(yǎng)作用...
重組腸激酶(Enterokinase,lightchain)是一種高度專一性識(shí)別Asp-Asp-Asp-Asp-Lys序列的蛋白酶,在Lys的C端水解多肽。它可以將胰蛋白酶原轉(zhuǎn)變?yōu)橐让?,也可以將帶有這個(gè)識(shí)別序列的融合蛋白切開(kāi)。由于腸激酶具有高度專一性,水解效率高的特點(diǎn),它被廣泛地應(yīng)用于基因工程產(chǎn)品的開(kāi)發(fā),其應(yīng)用之一是作為工具蛋白酶用于重組融合蛋白質(zhì)的特異性斷裂,尤其適用于生物工程制藥業(yè)及基因工程、生物化學(xué)、分子生物學(xué)等研究。腸激酶具有高度專一性,水解效率高的特點(diǎn),它被廣泛地應(yīng)...
細(xì)胞凍存是細(xì)胞生物學(xué)研究及藥物研發(fā)細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中需要經(jīng)常面對(duì)的常規(guī)操作。隨著細(xì)胞越來(lái)越嬌,人工越來(lái)越貴,各種細(xì)胞凍存液應(yīng)運(yùn)而生,如何從名目繁多的細(xì)胞凍存液中選擇變成一個(gè)問(wèn)題。本文從細(xì)胞凍存液分類,應(yīng)用場(chǎng)景,使用效果等多方面加以闡釋,希望能對(duì)如何選擇細(xì)胞凍存液有所助益。一、細(xì)胞凍存液的分類從成分劃分(1)滲透性和非滲透性滲透性保護(hù)劑分子量小可滲透到細(xì)胞內(nèi),如甘油、DMSO、乙二醇等,其在細(xì)胞冷凍存*凝固之前,滲入細(xì)胞內(nèi),降低細(xì)胞內(nèi)外溶液中的電解質(zhì)濃度,阻止細(xì)胞內(nèi)水分外滲,避免細(xì)胞過(guò)...
細(xì)胞凍存及復(fù)蘇的基本原則是慢凍快融,實(shí)驗(yàn)證明這樣可以最大限度的保存細(xì)胞活力。目前細(xì)胞凍存多采用甘油或二甲基亞砜作保護(hù)劑,這兩種物質(zhì)能提高細(xì)胞膜對(duì)水的通透性,加上緩慢冷凍可使細(xì)胞內(nèi)的水分滲出細(xì)胞外,減少細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成,從而減少由于冰晶形成造成的細(xì)胞損傷。復(fù)蘇細(xì)胞應(yīng)采用快速融化的方法,這樣可以保證細(xì)胞外結(jié)晶在很短的時(shí)間內(nèi)即融化,避免由于緩慢融化使水分滲入細(xì)胞內(nèi)形成胞內(nèi)再結(jié)晶對(duì)細(xì)胞造成損傷。細(xì)胞凍存是細(xì)胞培養(yǎng)、引種、保種和保證實(shí)驗(yàn)順利進(jìn)行的重要技術(shù)手段。在細(xì)胞建株和建系中,及時(shí)凍...
分子生物學(xué)的發(fā)展使得大量致病基因被鑒定,科學(xué)家在這些研究成果的基礎(chǔ)上發(fā)展了基因治療。基因治療是利用基因載體將治療基因?qū)牖颊唧w內(nèi),進(jìn)而表達(dá)功能蛋白以達(dá)到治療的目的?;蛑委焸鬟fDNA面臨的挑戰(zhàn)之一是外源治療基因會(huì)被體液和胞外空間的核酸內(nèi)切酶降解。治療基因在目標(biāo)組織中的選擇性積累、細(xì)胞內(nèi)化以及從溶酶體逃逸這些問(wèn)題對(duì)所有核酸治療劑都是需要克服的。DNA必須輸送至細(xì)胞核以允許獲得轉(zhuǎn)錄和表達(dá)。因此,設(shè)計(jì)和制備安全高效的基因載體來(lái)壓縮并且保護(hù)治療基因以免被核酸內(nèi)切酶降解并延長(zhǎng)其在體內(nèi)的...
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